期刊简介
本刊在李嘉诚先生的资助下，发展成为具有ISSN号和CN号，面向国内公开发行的综合性医学期刊。全年出版4期。现为中国学术期刊综合评价数据库来源期刊，《中国期刊网》、《中国学术期刊（光盘版）》全文收录期刊，中国科学技术信息研究所万方数据资源系统入网期刊。
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- 杂志名称：汕头大学医学院学报杂志
- 主管单位：广东省教育厅
- 主办单位：汕头大学医学院
- 国际刊号：1007-4716
- 国内刊号：44-1060/R
- 出版周期：季刊
期刊荣誉：Caj-cd规范获奖期刊期刊收录：知网收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 国家图书馆馆藏
无血清悬浮培养昆虫细胞表达人纤溶酶原Kringle5的研究
刘戈飞；黄东阳
关键词：无血清培养, 昆虫细胞, 杆状病毒载体表达系统, Kringle5
摘要：目的:使用杆状病毒载体表达系统在无血清悬浮培养的条件下进行Kringle5的表达.方法:对草地夜蛾卵巢细胞(Sf9)进行无血清培养驯化.构建Kringle5重组杆状病毒,通过三级扩增的方法制备重组病毒贮存液.Western方法确定Kringle5在Sf9细胞中的表达形式和表达条件.在培养体积为500 mL的无血清悬浮培养条件下对Kringle5进行表达.应用Ni2+亲合层析纯化了表达的重组蛋白,去除了氨基端融合的His-tag.应用原代培养人脐静脉内皮细胞测定了重组Kringle5的活性.结果:重组Kringle5蛋白的产量为1.7 mg/L,半数有效剂量(ED50)为109.2 nmol/L,去除氨基端His-tag序列后获得的Kringle5 ED50为59.59 nmol/L.结论:Kringle5可以在无血清悬浮培养Sf9细胞中进行高效表达,研究结果为进行Kringle5的大规模高效表达奠定了基础.
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